盐水反应性抗体的亲和力试验是一种用于评估抗体与红细胞相互作用强度的实验方法。这种实验通常采用血凝法进行。在血凝法中,将抗体与被测红细胞混合,观察形成凝集物的程度
2023年9月更新盐水抗体亲和力试验
1.目的:
检测盐水抗体亲和力主要适用于:盐水反应性抗体试剂的质检。
2.背景资料:
盐水反应性抗体的亲和力试验是一种用于评估抗体与红细胞相互作用强度的实验方法。这种实验通常采用血凝法进行。在血凝法中,将抗体与被测红细胞混合,观察形成凝集物的程度。通常可以通过时间和凝集物大小程度进行评估。通过逐渐稀释抗体浓度,可以确定最低稀释度(称为效价),在该稀释度仍能观察到红细胞凝集。这些实验可以提供有关红细胞抗体与红细胞之间结合强度的定型或(半)定量信息。
3.注意事项
尽量使用3天内红细胞,且红细胞直接抗人球实验阴性。
4.实验局限性
假阳性:试剂或样本受到污染反应平板污染
假阴性:样本污染新生儿红细胞样本或抗原弱表达红细胞反应平板污染
5.样本要求
尽量使用未开封试剂。
6.仪器和试剂:
计时器(秒表),新鲜制备红细胞
7.质量控制
根据中华人民共和国药典(2020年版),抗A抗B血型定型试剂(单克隆抗体)要求,抗A试剂与A1细胞、A2细胞、A2B细胞出现凝集时间应该在15秒、30秒和45秒之内;抗B试剂与B型红细胞出现凝集时间应该在15秒之内。3分钟之内出现1mm²凝块。
8.步骤
a.生理盐水将红细胞洗涤1-3次,配置成10%浓度红细胞悬液;
b.在血型定型板(瓷板,纸片等)一角加入50μL检测抗血清;
c.在血型定型板(瓷板,纸片等)另一角加入50μL检测10%红细胞悬液;
d.混匀,计时;
e.观察并记录出现凝集时时间以及出现1mm²凝块时间。
9.结果分析
试剂要求必须同时满足下表条件:
小编学习心得:
通过对盐水抗体亲和力试验的学习,小编以为,这个试验主要有两大应用场景。
1、可用于IgM类抗血清的质控,了解抗血清的亲和力强度。在日常工作中,我们需要对实验室用到的IgM类抗血清试剂(如抗A、抗B、抗D、抗E、抗C、抗e、抗c等)进行质量控制,确认其质量处于在控状态,以保证实验检测质量。
2、用于患者IgM类抗体的亲和力检测,可评估其血管内溶血的能力。对于日常工作中检测到的有临床意义的IgM类抗体,我们不仅需要检测其效价,同时也需要测定亲和力,以评估其在血管内的溶血能力,为临床安全有效输血提供更有力的参考与保障。